水中葉綠素a檢測水樣采集與保存要求（水中葉綠素a檢測步驟）

作者：霍爾德科技更新時間：2025-07-05

通過檢測水中葉綠素a可以來確定水體是否富營養化。大家都知道水體富營養化最主要的表現就是水中藻類大量的繁殖，而所有的藻類都含有葉綠素a，因此通過水體中葉綠素a的含量高低可以判斷該水中藻類的數量。其方法原理是將一定量樣品用濾膜過濾截留藻類，研磨破碎藻類細胞，用丙酮溶液提取葉綠素，離心分離后分別于750nm、664nm、647nm和630nm波長處測定提取液吸光度，根據公式計算水中葉綠素a的濃度。

水中葉綠素a檢測水樣采集與保存要求

水中葉綠素a檢測水樣采集與保存要求：

水樣的采集一般使用有機玻璃采水器或其他適當的采樣器采集水面下0.5m水樣，湖泊、水庫根據需要可進行分層采樣或混合采樣，采樣體積為1L或500ml。如果水樣中含沉降性固體（如泥沙等），應將水樣搖勻后倒入2L量筒，避光靜置30min，取水面下5cm水樣，轉移至采樣瓶。在每升水樣中加入1ml碳酸鎂懸濁液，以防止酸化引起色素溶解。

葉綠素a檢測水樣水樣采集后應在0℃-4℃避光保存、運輸，24h內運送至檢測實驗室過濾（若水樣24h內不能送達檢測實驗室，應現場過濾，濾膜避光冷凍運輸），水樣濾膜于-20℃避光保存，14d內分析完畢。

水中葉綠素a檢測步驟：

1.制備水樣

在過濾裝置上裝好玻璃纖維濾膜。根據水體的營養狀態確定取樣體積，具體可以參考過濾水樣體積，用量筒量取一定體積的混勻水樣，進行過濾，最后用少量蒸餾水沖洗濾器壁。過濾時負壓不超過50kPa，在水樣剛剛完全通過濾膜時結束抽濾，用鑷子將濾膜取出，將有水樣的一面對折，用濾紙吸干濾膜水分。

2.研磨

將樣品濾膜放置于研磨裝置中，加入3ml-4ml丙酮溶液，研磨至糊狀。補加3ml-4ml丙酮溶液，繼續研磨，并重復1-2次，保證充分研磨5min以上。將完全破碎后的細胞提取液轉移至玻璃刻度離心管中，用丙酮溶液沖洗研缽及研磨杵，一并轉入離心管中，定容至10ml。

3.浸泡提取

將離心管中的研磨提取液充分振蕩混勻后，用鋁箔包好，放置于4℃避光浸泡提取2h以上，不超過24h。在浸泡過程中要顛倒搖勻2-3 次。

4.離心

將離心管放入離心機，以相對離心力1000×g（轉速 3000 r/min～4000 r/min）離心10min。然后用針式濾器過濾上清液得到葉綠素a的丙酮提取液（試樣）待測。

5.水樣測定

將試樣移至比色皿中，以丙酮溶液為參比溶液，于波長750nm、664nm、647nm、630nm處測量吸光度。750nm波長處的吸光度應小于0.005，否則需重新用針式濾器過濾后測定。最后水樣中葉綠素a的質量濃度可以按照相應公式進行計算得出。